Study of the safety, immunogenicity and efficacy of attenuated and killed Leishmania (Leishmania) major vaccines in a rhesus monkey (Macaca mulatta) model of the human disease

We have compared the efficacy of two Leishmania (Leishmania) major vaccines, one genetically attenuated (DHFR-TS deficient organisms), the other inactivated [autoclaved promastigotes (ALM) with bacillus Calmete-Guérin (BCG)], in protecting rhesus macaques (Macaca mulatta) against infection with virulent L. (L.) major. Positive antigen-specific recall proliferative response was observed in vaccinees (79 percent in attenuated parasite-vaccinated monkeys, versus 75 percent in ALM-plus-BCG-vaccinated animals), although none of these animals exhibited either augmented in vitro gamma interferon (IFN-g) production or positive delayed-type hypersensitivity (DTH) response to the leishmanin skin test prior to the challenge. Following challenge, there were significant differences in blastogenic responses (p < 0.05) between attenuated-vaccinated monkeys and naïve controls. In both vaccinated groups very low levels of antibody were found before challenge, which increased after infective challenge. Protective immunity did not follow vaccination, in that monkeys exhibited skin lesion at the site of challenge in all the groups. The most striking result was the lack of pathogenicity of the attenuated parasite, which persisted in infected animals for up to three months, but were incapable of causing disease under the conditions employed. We concluded that both vaccine protocols used in this study are safe in primates, but require further improvement for vaccine application

Detection of early apoptosis and cell death in T CD4+ and CD8+ cells from lesions of patients with localized cutaneous leishmaniasis

Human localized cutaneous leishmaniasis (LCL), induced by Leishmania braziliensis, ranges from a clinically mild, self-healing disease with localized cutaneous lesions to severe forms which can present secondary metastatic lesions. The T cell-mediated immune response is extremely important to define the outcome of the disease; however, the underlying mechanisms involved are not fully understood. A flow cytometric analysis of incorporation of 7-amino actinomycin D and CD4+ or CD8+ T cell surface phenotyping was used to determine whether different frequencies of early apoptosis or accidental cell death occur at different stages of LCL lesions. When all cells obtained from a biopsy sample were analyzed, larger numbers of early apoptotic and dead cells were observed in lesions from patients with active disease (mean = 39.5 + or - 2.7 per cent) as compared with lesions undergoing spontaneous healing (mean = 17.8 + or - 2.2 per cent). Cells displaying normal viability patterns obtained from active LCL lesions showed higher numbers of early apoptotic events among CD8+ than among CD4+ T cells (mean = 28.5 + or - 3.8 and 15.3 + or - 3.0 per cent, respectively). The higher frequency of cell death events in CD8+ T cells from patients with LCL may be associated with an active form of the disease. In addition, low frequencies of early apoptotic events among the CD8+ T cells were observed in two patients with self-healing lesions. Although the number of patients in the latter group was small, it is possible to speculate that, during the immune response, differences in apoptotic events in CD4+ and CD8+ T cell subsets could be responsible for controlling the CD4/CD8 ratio, thus leading to healing or maintenance of disease.

Immunologic patterns associated with cure in human American cutaneous leishmaniasis

Patients with American cutaneous leishmaniasis were studied before therapy (active lesion) and at the end of therapy (cured patients). Assays of lymphocyte proliferative responses of peripheral blood mononuclear cells induced in vitro by Leishmania braziliensis promastigote antigens (Lb) were performed. Antigen-stimulated cells were harvested for CD4 and CD8 phenotype analysis and the levels of gamma interferon (IFN-gamma) and interleukin 4 (IL-4) produced were also determined in the culture supernatants. Two different patterns of Lb-induced T cell responses were observed: a) predominance of responding CD4+ cells and mixed type 1 and type 2 cytokine production (IFN-gamma and IL-4) during the active disease, and b) similar proportions of responding CD4+ and CD8+ cells, and type 1 cytokine production (presence of INF-gamma and very low IL-4) at the end of therapy (healed lesions). This last pattern is probably associated with a beneficial T cell response.

Serological survey for canine cutaneous and visceral leishmaniasis in areas at risk for transmission in Rio de Janeiro where prophylatic measures had been adopted

A serological survery for canine visceral (VL) and American cutaneous leishmaniasis (ACL) has been carried out during 1984-1989, to assess the effects of the prophylactic measures adopted in areas where there was a risk of transmission of the diseases in Rio de Janeiro. A previous serologival survey (1982/83) had detected serum positive dogas as well as the human disease in these same areas. A total fo 22,828 dogs have been examined in this last survey, 7,807 of which came from Campo Grande (VL and ACL area), 4,110 from Jacarepaguá (ACL area), 4,l46 from Realengo, 3,879 from Bangu and 2,886 from Senador Camará, (three VL areas). The analysis of these results showed a notable reduction in the number of serum positve dogs, compared to those of the first survey was 12.7%, against 0.62% of the second; (b) in Jacarepaguá (ACL) it decreased from 8.6%) to l.8% (c) in Bangu, Realengo and Senador Camará (VL) the rate decreased from 4.3% to 0.38%. The results indicate that this decrease was due to the prophylactic measures adopted in those areas

Aspectos ecologicos da leishmaniose tegumentar americana: 8. avaliacao da atividade enzootica de Leishmania (Viannia) braziliensis, em ambiente florestal e peridomiciliar, regiao do vale do Ribeira, Estado de Sao Paulo, Brasil / Ecological aspects of American tegumentary leishmaniasis: 8. Evaluation of the enzootic activity of Leishmania (Vianna) braziliensis, in forest and peridomiciliary environments of the Ribeira Valey region, Sao Paulo State, Brazil

A evidencia da transmissao extraflorestal da leishmaniose cutaneo-mucosa na regiao do Vale do Ribeira ensejou o presente estudo epidemiologico prospectivo, visando avaliar a atividade enzootica de L. (V.) braziliensis. A pesquisa paratisologica da infeccao natural em pequenos mamiferos e populacao canina foi complementada com o teste de imunofluorescencia indireta (IFI) para caes e captura de flebotomineos em ambiente florestal e peridomiciliar. A positividade para o teste sorologico e exame parasitologico somente foi observada para caes residentes e com taxas de 5,6 e 2,4 por cento, respectivamente. Entre animais silvestres e sinantropicos capturados, destacam-se os pertencentes a Oryzomys (Oligoryzomys) e Rattus rattus, ambos assinalados em proporcoes equivalentes (29,3 por cento) em ambiente peridomiciliar. Foram capturados apenas 166 exemplares femininos de Lutzomyia intermedia, fato atribuido a borrifacao das habitacoes humanas e anexos com DDT. No contexto epidemiologico mais amplo, discute-se a fragilidade do ciclo extraflorestal da L. (V.) braziliensis; o papel do cao e de pequenos mamiferos, como fonte de infeccao domiciliar, alem de analisar o potencial deles na dispersao do parasita na area estudada

Ocorrência da forma mucosa de leishmaniose tegumentar em cäes na regiäo do Vale do Ribeira, Estado de Säo Paulo, Brasil; resumo

Em cäes, nenhuma mençäo foi feita quanto à presença de manifestaçäo da forma mucosa. Recentemente, algumas famílias se instalaram numa área piloto de estudos epidemiológicos sobre leishmaniose tegumentar no Município de Miracatu, Estado de Säo Paulo, e, juntamente com esses indivíduos, varios cäes foram também incorporados às pesquisas em desenvolvimento. No cadastramento e exame dos novos componentes foi possível observar macroscópicamente a presença de cäes portadores de lesöes com aspecto de ulceraçöes nasais, pequenas lesöes em orelhas, escoriaçöes peladas e unhas longas. Desse modo, os animais suspeitos foram submetidos a diagnóstico com base em métodos de pesquisa de leishmania, tanto em pele íntegra como em lesöes, através do exame parasitológico direto, tentativa de isolamento em cultura e hamster; exame histopatológico; teste de imunofluorescência indireta (IFI); determinaçäo da procedência do animal e tempo de permanência na regiäo. Com essa metodologia consideraram-se 3 cäes com ulceraçöes nasais como portadores da infecçäo leishmaniótica. Sabemos que, devido ao caráter acidental desse encontro, näo é fácil interpretar esse resultado; contudo, há necessidade de se investigar a extensäo do problema e analisá-lo a luz das pesquisas realizadas em área de ocorrência de L. braziliensis e de flebotomíneos vetores. Portanto, precisa-se conhecer o significado epidemiológico da infecçäo canina, particularmente em área onde a doença assume feiçöes domiciliares como é o caso do Vale do Ribeira

Functional analysis of the murine T lymphocyte immune response to a protozoan parasite, Leishmania tropica.

Os resultados apresentados nesta revisao, sumariam uma serie de experimentos planejados no sentido de caracterizar a resposta imune de linfocitos T de camundongos, para o protozoario parasita Leishmania tropica. Populacoes enriquecidas de linfocitos T e clones de linfocitos T especificos para antigenos de L. tropica foram derivados de ganglios linfaticos de camundongos primados e a seguir mantidos em cultura continua in vivo. Ficou demonstrado que estes linfocitos T eram capazes de: A) Expressar o fenotipo de superficie celular Lyt 1+ 2-, B) Proliferar en vitro especificamente em resposta aos antigenos parasitarios quando em presenca de macrofagos singenicos irradiados, C) Transferir uma resposta tipo hipersensibilidade retardada antigeno especifico a camundongos normais singenicos, D) Induzir ativacao especifica de macrofagos parasitizados in vitro resultando em destruicao dos parasitas intracelulares, E) Providenciar uma atividade "helper" especifica para uma resposta com producao de anticorpos in vitro em um sistema haptenocarreador. Estudos de protecao utilizando estas populacoes definidas de linfocitos T poderao permitir a caracterizacao de antigeno(s) parasitarios implicados na inducao de uma resposta imune celular com beneficios para o hospedeiro

Outbreak of human toxoplasmosis in a rural area. A three year serologic follow-up study.

Foram estudados 36 individuos habitantes de uma fazenda do Estado de Minas Gerais nove dos quais adquiriram a forma linfonodular de toxoplasmose entre maio e agosto de 1976, apresentando titulos de anticorpos pela imunofluorescencia indireta - IF - entre 1:4096 e 1:32000 na classe IgG e entre 1:16 e 1:8000 na classe IgM. Doze das 36 pessoas da fazenda foram consideradas como casos "duvidosos", assim definidos ou por apresentarem quadro clinico compativel com toxoplasmose adquirida apesar de baixos titulos de anticorpos, ou por apresentarem nitido quadro clinico, mas com evidencias sorologicas de infeccao recente pelo T. gondii. As outras 15 pessoas estudadas nao mostraram evidencias clinicas principais formas de transmissao: a) carne de porco mal cozida durante um churrasco na fazenda; b) solo e vegetais contaminados com oocistos de T. gondii (ciclo gato-rato). O acompanhamento sorologico da populacao humana, nove meses apos, demonstrou titulos ainda elevados na classe IgG embora com tendencia ao declinio e soros nao reagentes na classe IgM.Apos os titulos na classe IgG eram quase compativeis com os titulos observados en inqueritos sorologicos em outras populacoes brasileiras

Morbidade da esquistossomose mansoni no Brasil. I - Estudo de 4.652 casos observados no Rio de Janeiro de 1960 a 1979. / Morbidity of schistosomiasis mansoni in Brazil. I - Study of 4652 cases observed in Rio de Janeiro from 1960 to 1979

No periodo de vinte anos (1960-1979), os autores observaram na Clinica de Doencas Infecciosas e Parasitarias da Faculdade de Medicina da Universidade Federal do Rio de Janeiro, sediada no Pavilhao Carlos Chagas do Hospital Sao Francisco de Assis, 4.652 casos de esquistossomose mansoni procedentes de 18 Estados do Brasil. Entre os casos observados 87,18% eram da forma hepatointestinal e 12,82% da forma hepatoloesplenica entre os quais 30 tinham a forma pulmonar associada.Adicionalmente 30 casos da forma aguda ou toxemica foram estudados no mesmo Servico, em familias residentes no Rio de Janeiro.Alem da observacao clinica e do estudo epidemiologico incluindo o perfil migratorio de cada caso e da casuistica como um todo, foram realizados exames complementares como hemograma, mielograma, dosagem de transaminases, provas de funcao hepatica, eletroforese de proteinas sericas, biopsia hepatica, radiografia de torax e de esofago, esplenoportografia, eletrocardiograma e estudos hemodinamicos do sistema porta, do coracao e da arteria pulmonar em grupos de pacientes selecionados